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本人在做一个2000bp的片段的，每次总是淡淡的（因为有一个800bp左右的杂带，还比较亮），总怕胶回收后的浓度不够（用于连接反应），所以想把胶回收的产物再做一回PCR，可行不，条件要调整吗？比如模板量？
该用户从未签到
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我的杂带似乎很难弄掉，所以只能想其他办法了，除了多做几管一起回收外，二次PCR应该是可行的吧？
该用户从未签到
生物秀举人
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二次PCR是可行的，对第一次的PCR进行胶回收，再次进行PCR，条件一般不需要变化。
DNA本身的二级结构可能导致PCR的产物条带很暗，有时需要进行二次PCR，我这样做过，也成功了。
Good Luck！
该用户从未签到
谢谢，我今天要试一下，下午看结果
该用户从未签到
你做二次pcr的时候，模板是否稀释了，我没有稀释直接拿来做二次，结果条带还是很暗啊。
该用户从未签到
生物秀超级版主
你用的PCR原液还是回收以后的做模板？？？
最好都稀释一下
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生物秀举人
请问条带暗需不需要稀释PCR原液？
该用户从未签到
我的邮箱是，[email=,QQ是.，如果可以的话，能联系我么，想请教你PCR的问题，我的目的基因是1250bp的，但是第一次PCR扩出来，条带比较暗，但是以它纯化后为模板，就再也P不出来了，出来的就值一片，绝对没有降解。,QQ是.，如果可以的话，能联系我么，想请教你PCR的问题，我的目的基因是1250bp的，但是第一次PCR扩出来，条带比较暗，但是以它纯化后为模板，就再也P不出来了，出来的就值一片，绝对没有降解。[b[/email]]
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生物秀举人
呵呵,我怎么没想到我的PCR产物二次扩增呢?
该用户从未签到
恩，我和你的是一样的，二次PCR就是一片了，很奇怪，胶回收再做模板也是这样，是不是因为模板浓度太大了，需要稀释呢？
大家的2次PCR都成功了嘛？
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murongxiaoxiao大叔级摄影爱好者，喜欢分享绝对零度积极有责任心，热心公益事业yiii红米达人，爱拍照的北京女孩页面已拦截
无锡网警提示您：
该网址被大量用户举报，可能含有恶意信息。1、PCR精度、间隔、PCR_Oj这些和CC错误（连续计数错误）没有必然联系
2、对于udp ts组播来说，如果不严格控制发送速度，容易引起cc错误
3、PCR_Oj可以作为调节发送速度的参考，如果发送更均匀，PCR_OJ会降低（不是攒一堆，一下子发，所以延迟会更低）
4、发送速度，也可采用EasyICE的更小粒度的码率统计（如10ms）来进行码率统计来进行参考
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请教关于女儿室间隔缺损的问题
状态：就诊前
状态：就诊前
彩色多普勒：过室间隔探及0.3LM左向右分流
多普勒频谱：
主动脉瓣：未见异常；二尖瓣：未见异常；三尖瓣：未见异常；肺动脉瓣：未见异常
过室间隔左向右分流Vmax=240cm/S
各房室大小正常，主动脉直径正常，肺动脉直径正常，左室收缩运动幅度正常，各瓣回声及活动未见异常，心包未见异常。
超声印象：
室间隔缺损
状态：就诊前
日阜外医院超声：
M型及二维
主动脉：瓣结构 正常；瓣开放幅度 mm；瓣环内径 11mm；窦部前后径 13mm；升动脉径 12mm；工降部正常
左房：前后径 14mm；左房/主动脉 1.2；房间隔延续 正常
左心室：室间隔厚度 14mm；室间隔延续 中断；舒张末期前后径 31mm；后壁厚度 4mm；心包 正常
运动与后壁 反向；收缩末期内径 mm；EF 66%
右心房 正常；右心室前后径 8mm
肺动脉瓣结构 正常；主肺动脉径 9mm；右肺动脉径 mm；左肺动脉径 0mm
二尖瓣结构 正常；三尖瓣结构 正常
状态：就诊前
多普勒超声
二尖瓣 舒张期 流速0.9 压差3.2
三尖瓣 舒张期 流速0.7 压差2.0
主动脉瓣 收缩期 流速1.0 压差4.0
肺动脉瓣 收缩期 流速1.3 压差6.8
状态：就诊前
左室内径轻度增大，左室流出道偏宽，室间隔与左室后壁不厚，运动增强。房间隔连续完整，室间隔膜部回声中断约3.5mm。各瓣膜形态结构及启闭运动正常。大动脉发育正常，主动脉弓降部未见异常。
多普勒检查：收缩期室水平探及左向右高速分流信号。
诊断 先天性心脏病 室间隔缺损（膜部） 室水平左向右分流
状态：就诊前
同日阜外医院X线诊断报告
临床印象：室缺
第1，2片
两肺血多，未见实变
主动脉结不宽
肺动脉段平直
心胸比 0.6
印象：左向右分流先心病，室间隔缺损。
状态：就诊前
日超声同二楼，就是过室间隔左向右分流Vmax=270cm/S
日超声同二楼，就是过室间隔左向右分流Vmax=220cm/S，心尖部见一纤维条索连与室间隔，诊断意见：室间隔缺损，左室假腱索。
状态：就诊前
检查结果上传完毕，女儿2008年11月生，给李主任添麻烦了，不胜感激。
建议手术。可通过预约相关事宜。
状态：就诊前
请问李主任，就现有资料，您认为何种术式较为恰当。
状态：就诊前
再请教李主任，是否应该尽快手术？
建议不超过三岁手术。
状态：就诊前
真情寄语：
送一朵美丽的鲜花给您，感谢您的无私帮助。
状态：就诊前
请教李主任，想了解一下手术的费用大概需要多少，如果多的话需要提前筹措。
费用一般在三万左右。
状态：就诊前
谢谢李主任。
状态：就诊后
使用预约转诊服务
流***，医生已同意您的门诊预约申请
患者姓名：流***（保密）
身份证号：
**********（保密）
就诊时间： 08:00:00
就诊疾病：
病情描述：
就诊程序：
1、这是跟医生个人的预约。只有医生或他指定的助手知道这个预约。
2、先要在医院里指定地点找到医生本人，出示转&诊短信凭证，请医生开转&诊条。
3、持医生开具的转&诊条，挂号室挂号后排队看病。
特别注意：
1、不得爽约！
2、医生有可能临时停诊。
3、仅保证您当天就诊可以看上医生，并无任何优先，请按挂号顺序看病。
状态：就诊后
疗效：很满意 && 态度：很满意
自打发现孩子的心脏有问题以后，全家一直压力很大，想到阜外医院就诊，又担心挂不上专家号，一个偶然的机会，发现可以在网上和李守军主任这样高水平的专家咨询治疗的方法，还可以通过网上加号，得到和李主任面对面交流的机会，感谢李主任，感谢好大夫在线。
李守军大夫通知分享:
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
李守军大夫通知分享:
大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
疾病名称：卵圆孔未闭&&室上嵴肥厚&&室间隔缺损（膜周部） 室水平左向右分流&&室间隔缺损（膜周部）&&先心室间隔缺损肺高压&&室间隔缺损&&
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疾病名称：先心室间隔缺损&&
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m／S.二,三尖瓣形态活动可,CFM示三尖瓣口,肺...
疾病名称：心室间隔缺损3。5毫米&&
病情描述（发病时间、主要症状、就诊医院等）：
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疾病名称：四月胎儿彩超显示心室间隔缺损&&
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疾病名称：先心室间隔缺损&&
病情描述（发病时间、主要症状、就诊医院等）：
医生：你好！我家小孩早产33+3周，出生时体重1765克，现在三个月了，体重为8.3斤，身高53CM。出生时查处有心脏病室间隔缺损。超声描述如下：
投诉类型：
投诉说明：（200个汉字以内）
李守军大夫的信息
14岁以下先天性心脏病外科治疗,尤其是婴幼儿复杂先心病如复杂大动脉转位、右室双出口、共同动脉干、复杂二尖...
李守军，男，主任医师，教授，博士生导师。现任阜外医院小儿心脏外科中心主任，主持小儿外科中心工作，兼任...
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