【doc】骨组织及软组织修复作用中富血小板血浆的制作及其原理
扫扫二维码，随身浏览文档
手机或平板扫扫即可继续访问
【doc】骨组织及软组织修复作用中富血小板血浆的制作及其原理
举报该文档为侵权文档。
举报该文档含有违规或不良信息。
反馈该文档无法正常浏览。
举报该文档为重复文档。
推荐理由：
将文档分享至：
分享完整地址
文档地址：
粘贴到BBS或博客
flash地址：
支持嵌入FLASH地址的网站使用
html代码：
&embed src='/DocinViewer-4.swf' width='100%' height='600' type=application/x-shockwave-flash ALLOWFULLSCREEN='true' ALLOWSCRIPTACCESS='always'&&/embed&
450px*300px480px*400px650px*490px
支持嵌入HTML代码的网站使用
您的内容已经提交成功
您所提交的内容需要审核后才能发布，请您等待！
3秒自动关闭窗口503 Service Temporarily Unavailable
503 Service Temporarily Unavailable
nginx/1.4.1本站已经通过实名认证，所有内容由沈国良大夫本人发表
当前位置：
& 大夫个人网站
& 文章详情
富血小板血浆在治疗慢性难愈创面中的应用
&&& 慢性难愈创面（chronic non?healing wounds）目前尚无明确定义，通常理解为在各种内在或外界因素作用下创面不能通过正常的创面愈合进程达到愈合，进入一种病理性炎症反应状态，从而导致创面经久不愈［1］。传统的治疗对慢性难愈创面效果不佳，而生长因子的出现使创面愈合的治疗从被动转为主动，为慢性难愈创面的治疗带来了希望，但生长因子的局部应用受创面微环境影响而使其灭活快、作用时间短，难以达到预期的治疗效果，同时也受到给药途径、剂型和经济负担的限制。20世纪90年代以来，国内外一些学者发现富血小板血浆(platelet?rich plasma，PRP)中含有高浓度的生长因子，随后一些学者发现PRP具有明确的促进创面愈合、成骨及软组织修复的作用和加速骨愈合的能力，它能明显缩短创面愈合时间，提高骨愈合质量，并且由于PRP完全来源于自体，无疾病传染及免疫排斥反应，制作简单，对组织损伤小，因此在临床上具有良好的应用前景［2］。本文主要对PRP的制备、成分、应用及其前景做一综述。　　1& 富血小板血浆&&& Harke等［1］于1977年首次分离制备富血小板血浆(platelet?rich plasma，PRP)，成功地将其用于心脏外科手术患者，避免了体外循环（cardiopulmonary bypass,CPB）期间血小板功能的损伤和术后失血。近年来自体 PRP已广泛应用于心脏外科手术、口腔颌面外科以及骨组织和软组织缺损修复等，并取得满意效果。　　1.1& 富血小板血浆分离原理　　1.1.1& 目前制备PRP的方法主要有血浆分离置换法和离心分离法。血浆分离置换法是利用多功能医用血成分自动分离设备单采血小板成分，自动化程度高，制备得到的PRP血小板纯度和浓度均高，但此方法一般用于用血量较多(一般在150ml以上)或需建立静脉循环通道，采集血小板后将其他血成分回输者。该设备价格昂贵，限制了在临床上的广泛应用，目前主要用于血库血小板的采集以进行成分输血。离心分离法制备PRP对设备要求低，步骤简单，其制作原理为：血液中各组分的沉降系数不同，1次离心后血液分为3层，最底层是沉降系数最大的红细胞层，最上层是血清层，交界处有一薄层(肉眼不易看见)，即富血小板层；1次离心后弃去上清层或红细胞层，然后改变离心力再次离心，使更多的血小板分离出来。进行离心分离法时通常第1次离心选择较低的离心力，以避免血小板过快沉降，而第2次离心采用较高的离心力，以促使血小板在较短时间内完全沉降。实验证明，在界面附近血小板含量最丰富，保留界面以下lmm的红细胞层可大大提高血小板获得率，减少血小板耗损。&&& Landesberg等［2］以不同离心力和离心时间2次离心制作PRP时发现，离心力&250g会导致血小板破坏过多，而1次离心时间&5分钟时得到的PRP血小板浓度与全血无明显差异；建议1次离心后弃掉红细胞层，然后再次离心，2次离心均采用200g的离心力且离心10分钟，这样制作的PRP血小板计数明显高于全血，为全血的6.17倍，血小板回收率为86.44 %。Marx等［3］在制作PRP时发现，先进行高速离心，1次离心后界面以下2mm的红细胞层血小板浓度最高，弃去上清液后再次以低速离心，这样可更好地提取血小板。但多数学者研究认为，采用改良Appel法［4］，即先以低速离心后吸取全部上清液、交界层下少部分红细胞置于另一支离心管，然后高速离心，所得的血小板回收率较高。　　1.1.2& PRP中血小板浓度可达全血的16倍［5］，且其含有高浓度的生长因子，主要为血小板源性生长因子(PDGF)、转化生长因(TGF)?β、血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子(IGF)及表皮生长因子(EGF)等。经酶联免疫吸附试验证实，PRP中PDGF、TGF?β、VEGF和EGF的浓度为体内正常浓度的3～8倍［6］。此外，PRP内的纤维网络对促进细胞粘附、防止细胞流失也具有一定作用。　　1.1.3& 目前，以PRP为载体的生长因子已经成功应用于临床，但都是患者自体的PRP。如果患者分离过多的血液，那么就会导致或者影响身体健康。为了克服这一限制，HUANG Qian ［7］设计从异体的PRP中分离生长因子。研究结果表明，从PRP中分离出来的生长因子有四个部分：A、B、C、D，其中大部分的生长因子都是在B和C部分，而且可以有效地促进细胞增殖；分离出来的生长因子，经真空冷冻干燥后储存，仍可保持原来的生物活性。　　1.2& 富血小板血浆凝胶的制备和激活　　无论以何种原理分离的PRP，临床上PRP多以凝胶的形式应用，PRP凝胶是PRP与氯化钙和凝血酶混合而成的一种具有粘性的胶状凝块。目前已被证实最好的PRP激活剂是10mg/ml氯化钙溶液(一种枸橼酸盐抑制剂能够使血浆凝固)和100U／mL牛凝血酶(一种激活剂能使纤维蛋白聚集成不可溶解的凝胶，诱导血小板脱颗粒并释放介质和细胞因子)混和制成。使用前，PRP与激活剂按1：1的比例及少许空气混和、摇匀，经6～10S后即制成PRP凝胶，均匀铺于创面，外面覆盖生物材料或者纱布，增加凝胶与创面接触的时间。&&&& 最近，I.Martineau等［8］研究表明，氯化钙和凝血酶调节PRP中生长因子的释放、合成和降解，而且每一种生长因子都有自己特定的模式。不同浓度的氯化钙和凝血酶对PRP中生长因子的影响是有很大区别的，比如当凝血酶的浓度是142.8U/ml时，EGF的浓度处于最高水平，当氯化钙的浓度是14.3mg/ml时，IL-1的浓度是最高的。　　1.3& 富血小板血浆的作用机理　　1.3.1& PRP作用的发挥有赖于其浓缩血小板被激活后a颗粒释放出高浓度的各类生长因子及纤维蛋白原所形成的纤维网状支架［9］，包括血小板衍生生长因子(PDGF)，转移生长因子-β1β2(TGFβ1β2)，血管内皮生长因子(vEGF)，血小板衍生内皮细胞生长因子，白介素?1 (IL?1)，表皮生长因子（EGF)，成纤维细胞生长因子，血小板激活因子［10］。这些因子是诱导组织生长所不可或缺的，纤维蛋白原所形成的纤维网状支架可支持生长因子诱导生成新生组织。这些因子在刺激成骨细胞和前成骨细胞的增殖，抑制破骨细胞的形成和骨吸收， 增加胶原合成能力，促进内皮细胞增殖，诱导新生血管生成，刺激体内多种类型组织细胞的分裂和增殖，促进基质合成和沉积，促进纤维组织生成的过程中起着不可或缺的作用。　　1.3.2& PRP中含有高浓度的激活的生长因子加速创面愈合，由于各生长因子的比例与体内正常生理浓度相近，能使各生长因子之间发挥最佳的协同作用［11］。同时PPP含有大量纤维蛋白，能为修复细胞提供良好的支架，可刺激软组织再生，促进伤口早期闭合和防止［12］。国外有学者［13］在通过对结肠缝合术后裂开压力的测量实验中发现PRP在降低炎症发生的过程中也发挥着重要的作用，最新研究证实［14］，这一作用的机理是PRP中的巨噬细胞释放IL?1特定的原始抑制因子，控制早期炎症的发生。　　1.3.3& PRP凝胶可以防止血小板的流失，使血小板在局部长时间分泌生长因子，这些外源性生长因子促修复作用：(1)作为化学趋化剂趋化炎性细胞与组织修复细胞，为创面杀菌以及后期修复创造条件；(2)直接作用于组织修复细胞上生长因子受体，通过其促分裂效应加快细胞周期转变来促进创面修复；(3)激活上调组织修复细胞上生长因子受体活性，加快信号传递［15］。&&　　此外，PRP不仅含有高浓度的血小板并且富含凝结因子，正常情况下这些凝结因子保持着正常的生理水平。被激活的血小板所包含的大量的蛋白在创面愈合过程中有着促进作用，血小板在凝结后l0分钟就能激活这些蛋白，从而缩短愈合的临床过程。　　2& 富血小板血浆在慢性难愈创面愈合中的作用&&& 创面愈合是一种特定的对完整组织再生的宿主免疫反应，实验证明，创伤时创面的生长因子活性改变，即合成减少、降解和失活增加［16］。局部使用PRP，创面出血部位可以获取混合的血小板和冷沉淀物，增加外源性生长因子。　　2.1& 目前研究证实PDGF通过增加细胞的移动增殖以及增加细胞基质产物促使肉芽组织快速形成而发挥作用。在创面的成纤维细胞和角质细胞内有PDGFmRNA的表达，因此PDGF能够增加创面成纤维细胞和炎症细胞的浸润，在损伤后期诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞转变，使伤口组织胶原合成增加，促进肉芽组织生长。&&　　人TGF?β有三种亚型，即TGF?β1?3，各亚型在体内空间及损伤后时间分布各不相同。有研究表明，组织创伤后的炎症前期，局部相关的细胞因子有所增加，而TGF?β水平暂时下降，胶原沉积减少。激活的血小板可产生TGF?β，TGF?β对细胞分化、增生、炎症过程具有刺激作用，对细胞外基质的合成、重塑具有独特作用。TGF?β不仅通过促进成纤维细胞趋化，产生胶原纤维和细胞外基质，还可减少胶原酶的合成，增加金属蛋白酶抑制剂的产生，从而减少伤口中的酶解作用，促进伤口愈合。实验证明，在伤口模型中注入外源性TGF?β，可激活成纤维细胞，刺激胶原纤维生成，促进伤口愈合，TGF?β1 、TGF?β2还可增加伤口愈合拉力［17］。EGF与受体结合后发挥活性，EGF受体几乎在所有细胞都有表达，但以表皮细胞最为丰富。皮肤损伤后，局部使用PRP后可释放EGF。EGF不仅加速表皮生长，而且有增加基质形成和结缔组织收缩的作用。动物切割伤模型已证实外用EGF能加速表皮生长并增加伤口愈合张力。研究显示，重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbF—GF)和重组人表皮生长因子(rhEGF)均具有创面修复作用，二者比较rhbFGF在修复早中期促进肉芽组织生成，rhEGF在中晚期可加速创面的上皮化［18］。&&& IGF包括IGF?1和IGF?2，其中IGF?1在创伤修复中的作用研究的比较多。PRP中有高浓度的IGF?1，当其被释放后，是血管内皮细胞的趋向剂，可以刺激血管内皮细胞迁移到创伤部位，促进新生血管的形成。IGF?1也可以促进许多细胞生长，如成纤维细胞、骨细胞和软骨细胞。此外，IGF?1可以与PDGF协同作用增加表皮和内皮的再生。&&& VEGF包括VEGFA、B、C、D、E和胎盘生长因子。最早发现的VEGFA，具有促进血管新生及增强血管通透性的作用。VEGFA与内皮细胞表面受体VEGFR1和VEGFR2结合，促进内皮细胞合成NO，激活血管新生。VEGFA还可促进内皮细胞分裂。VEGFC主要与淋巴管内皮细胞上的VEGFR3受体结合，同时也可与VEG?FR2结合。它是内皮细胞的化学趋化及分裂因子，可能同时具有促进血管及淋巴管新生的作用。VEGFD与VEGFC相似，具有促进血管及淋巴管新生的作用。　　2.2& 在实验与临床研究中，PRP表现出良好的促进难愈合伤口的修复作用。Carter在用PRP修复马小腿伤口的实验中，发现PRP的修复效果明显好于对照组，认为PRP里大量的生长因子弥补了马小腿伤口处生长因子过少，较快地启动了修复机制，形成上皮组织，加快血管再生，为伤口的修复提供了较好的环境和血供。另外，在实验中还发现，PRP治疗组伤口瘢痕小，可能由于PRP中含有大量白细胞和单核细胞，抑制了伤口处的炎症反应，导致瘢痕较少［19］。但是，Monteiro［20］在使用PRP修复马前肢远端伤口的实验中，通过伤口组织学检查、测量TGFβ1、生物学材料评估以及胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA 检测，发现PRP对小面积的创面作用不明显，而更适合于大面积组织缺损的治疗，同时也认为是为治疗慢性创伤提供一个新的渠道。Crovetti［16］用PRP治疗皮肤溃疡，与对照组相比，发现PRP能更好地在伤口处形成肉芽组织，促进伤口上皮组织完全再生。PRP在局部释放多种生长因子共同促进了伤口的恢复，如TGF?β对中性粒细胞和单核细胞的趋化作用介导伤口的炎症反应，PDGF刺激成纤维细胞的增殖分化，促进组织重塑，VEGF则加快血管再生，但是治疗组患者的疼痛是否明显较对照组减轻，目前尚未证实。Lee［21］等研究和评价PRP治疗家兔全层皮肤缺损的促进作用。分0.3ml,0.6ml,0.9ml三组治疗剂量，一周和两周后测定创面上皮形成率、创面收缩率、组织填充及体积分数的成纤维细胞等，结果表明，PRP通过加速上皮移行和血管原性反应，减少创面面积，达到治愈全层皮肤的作用；同时也提出了，可以通过改变PRP的治疗时间间隔和治疗剂量，探究和评价PRP在治疗创面时的长期效果。Hom［22］等使用PRP治疗全层真皮缺损创面进行前瞻性研究，结果表明，使用PRP组与使用抗生素软膏组和半暴露疗法组相比，创面愈合的速度更快，瘢痕增生不明显。GUO等［23］对47例下肢慢性难愈创面（均是经过2～4个月治疗未愈合）进行临床观察：创面清创后注射自体PRP凝胶，每两个月注射1次或者两次，随访4个月，2个月后表现出软组织循环明显改善，创面大量肉芽组织生长；4个月后创面愈合率高于79.3%并且具有统计学意义。结果表明，PRP有效地增强软组织缺损的修复和加速下肢慢性难愈创面的愈合。Marquez等［24］对10例眼睛化学的患者应用自体PRP,治疗组结膜下注射PRP，对照组使用传统方法，结果治疗组的治疗时间明显缩短、瘢痕形成也不明显，认为是PRP中大量的生长因子通过细胞膜微孔上的受体间的相互作用参与细胞间的信息联络，此外，可以加强细胞的增殖、分化，促进创面的愈合。　　3& 富血小板血浆的发展优势和存在问题　　3.1& 目前临床使用的PRP是通过离心自体全血得到的血小板浓缩物，近年来已受到很多学者的关注。研究证实，PRP具有许多独特优势：第一，PRP是自源性的，这从根本上解决和避免了外源性生长因子引起的免疫排斥、疾病传染及异种重组基因产品可能改变人类遗传结构的担忧。第二，PRP 制备简便、快捷，方法较为成熟，检测手段规范，制备质量有保证。第三，PRP含有多种高浓度的生长因子，各生长因子的比例与体内正常比例相似并具有最佳的协同作用，这在一定程度上弥补了单一生长因子治疗的缺点。第四，用凝血酶可将PRP凝固成胶状，胶状PRP不仅可粘合组织缺损，还可防止血小板的流失，使血小板在局部长时间分泌生长因子，保持较高的生长因子浓度。第五，PRP制备对患者的损伤小，只需从患者静脉取血即可。国外现已生产出专门的PRP制作机，可先从静脉取血，在提取高浓度血小板后将剩余血成分回输体内，此方法成本低，可减轻医疗费用。第六，到目前为止，还没有发现PRP对机体的不良反应。　　3.2& PRP的缺点，极大地限制了其在临床的推广应用：（1）在开放的系统内制备及在多个容器中转移，易受外界污染；（2）血小板在体外易受外源性刺激而破坏或激活，例如抽血时间过长、针头过小、应用止血带、不适当的抗凝剂和存血器、摇匀程度、放置时间等，都会人为地造成血小板活化；（3）血小板与生长因子浓度的关系较复杂，可能受制作过程中多种因素的影响，也可因血小板激活方式(冷冻激活、凝血酶激活)、激活程度、生长因子检测试剂盒灵敏度的差异产生变化；（4）血小板及其生长因子在体内的寿命不超过5天，即使PRP在凝血酶或钙离子的激活下形成凝胶块，凝胶块中的血小板内容物(包括生长因子)持续释放也仅为1周左右，不可能作用于组织修复的全过程。　　3.3& 当然，今后还有许多问题亟须解决，比如：（1）进一步建立高效稳定的PRP制作方法，研究不同方法制作和不同浓度激活剂的PRP分泌的生长因子生物学性能，明确PRP凝胶在体内分泌的生长因子及各种生长因子之间的相互作用，判断PRP用于创面修复的最佳治疗浓度和治疗时间；（2）从异体PRP中分离生长因子已被广泛关注，理论上这种方法可以减少免疫原性，防止免疫排斥，但是还需要进一步研究证实［7］；（30研究不同的PRP产品，适应不同的临床使用条件，并且规定生产技术流程和产品安全问题［25］。相信伴随着人们对PRP研究的不断深入，PRP的应用会更广更方便。【参考文献】& 　［１］Harke H，Tanger D，Furst?Denzer S，et al．Effect of a preoperative separation of platelets on the postoperative blood loss subsequent to extrac0rp0real circulation in open heart surgery［J］．Anaesthcsist.):64～71.　　［2］Landesberg R，Roy M，GlickiTlarl RS．Quantification of growth factor levels using simplified method of platelet?rich plasma gel preparation［J］．J Oral Maxillofac Surg.)：297～300.　　［3］Marx RE，Carlson，Eichstaedt RM，et al．P1atelet rich plasma：Growth factor enhancement for bone graft Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod.)：638～646.　　［4］Appel TR，Potzsch B，Muller J，et al．Comparison of three different preparations of platelet concentrates for growth factor enrichment［J］．Clin Oral Implants Res．)：522～528.　　［5］Dugrillon A，Eichler H，Kem S，et al．Autologous concentrated platelet?rich plasma(PRP)for local application in bone regeneration［Ｊ］． Int J Oral Maxillofac Surg.)：615～619.　　［6］Eppley BL，Woodell JE，Higgnis J．Platelet quantification and growth factor analysis from platelet?rich plasma ：implications for wound healing［Ｊ］．plast Recorkstr Surg.)：.　　［7］HUANG Qian,WANG Yun?dan,WU Tao,et al.Preliminary separation of the growth factors in platelet?rich plasma:effects on the proliferation of human marrow?derived mesenchymal stem cells［Ｊ］.Chinese Medical Journal.):83～87.　　［8］J.P.Frechette,I.Martineau,G.Gagnon,et al.platelet?rich plasma:growth Factor content and Roles in Wound Healing［Ｊ］.Journal of Dental Research.～439.　　［9］Garg AK,Gargenese D,peace I.Using platelet?rich plasma to develop an autologous membrance for growth factor delivery in dental implant therapy［Ｊ］.Dent Implantol Update.):41～44.　　［10］Serdar Yol,M.D.,Ahmet Tekin,M.D.et al.Effects of platelet rich plasma on colonic Anas tomosic［Ｊ］.Journal of Surgical Research.～194.　　［11］Marx RE．Platelet?rich plasma：evidence to support its use［Ｊ］．J Oral Maxillofac Surg．)：.　　［12］Eppley BL，Woodel1 JE，Higgin J．Platelet quantification and growth factor an alysis from platelet?rich plasma：implications for wound healing［Ｊ］．Plast Reconstr Surg.)：.　　［13］Marx RE．Plate1et?rich plasma(PRP)：What is PRP and what is not PRP［Ｊ］.Implant Dent.5.　　［14］Woodall J Jr,Tucci M,Mishra A,et al.celluar effects of platelet rich plasmainterleukin1 release from prp treated macrophsges［Ｊ］.Biomed Sci Instrum.～494.　　［15］付小兵，王正国．现代高新技术与创伤修复［M］．北京：人民军医出版社，7．　　［16］Crovetti G,Martinelli G,Issi M,et al.platelet gel for healing cataneous chronic wounds［Ｊ］.Transfus Apher Sci.):145～151.　　［17］WrightTE，Hill DP，Ko F，et al．The effect of TGF?beta2 in various vehicles on incisional wound healing［J］．Int J Surg Investig，)：133～143．　　［18］邢帮荣，利天增，卞徽宁．表皮生长因子与碱性成纤维细胞生长因子促进创面修复的比较研究［J］．中华杂志，)：340～343．　　［19］Carter CA，Jolly DG，Worden CE Sr，et al．Platelet?rich plasma gel promotes differentiation and regeneration during equine wound healing［J］．Exp Mol Pathol.4～255．　　［20］Monteiro So,Lepage OM,Theoret CL,et al.effects of platelet?rich plasma on the repair of wounds on the disal aspect of the forelimb in horses［Ｊ］.Am J Vet Res,):277～282.　　［21］Lee HW,Reddy MS,Geurs N,et al.efficacy of platelet?rich plasma on wound healing in rabbits［Ｊ］.J Periondontol.):691～696.　　［22］Hom DB,Linzie BM,Huang TC.The healing effects of autologous platelet gel on actue human skin wounds［Ｊ］.Arch facial plast Surg.～183.　　［23］Guo Y,Qiu J,Zhang C.follow?up study on platelet?rich plasma in repairing chronic wound nonunion of lower limbs in 47 cases［Ｊ］.Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi.):.　　［24］Marquez R,Montero I,Munoz M,et al.subconjunctival application of plasma platelet concentrate in the treatment of ocular burns.preliminary results［Ｊ］.Arch Soc Esp Oftalmol.～482.　　［25］Borzini P,Mazzucco,Giampaolo A,et al.platelet gel?the Italian way:a call for procedure standardization and quality control［Ｊ］.Transfus Med.～304.转贴于 中国论文下载中心 http://www.studa.net
发表于： 21:51
暂无评论，我来发表第一篇评论！
沈国良大夫的信息
网上咨询沈国良大夫
在此简单描述病情，向沈国良大夫提问
沈国良的咨询范围：
面部除皱、重睑、眼袋、隆鼻、抽脂、隆乳、巨乳缩小，处女膜修补、腋臭根治、四肢整形等手术；烧伤及疤痕防治；手外伤及创伤修复由轻度酸化的CPD血快速制备浓缩血小板--《国际输血及血液学杂志》1984年01期
由轻度酸化的CPD血快速制备浓缩血小板
【摘要】：正 制备浓缩血小板(PC)一般是通过两次离心程序来完成。先将抗凝全血离心制备富血小板血浆(PRP),再以更高的离心力第二次离心。结果沉淀中常含有不易再混悬的血小板聚集物。有两种方法可使压实的血小板沉淀物容易再混悬:(1)在第二次离心前加ACD,使PRP的pH降低;(2)在第二次离心后将PC在室温静置1小时。本文比较了从CPD全血制备PC的这两种方法。作者对14名健康人,每人采450ml全血,置含有63mlCPD抗凝剂的标准塑料袋中。在采血过程中不断摇动血袋,采后1小时内将血袋在20℃以275g离心
【关键词】：
【正文快照】：
沪,,月,﹁ 制备浓缩血小板(PC)一般是通过两次离心程序来完成。先将抗凝全血离心制备富血小板血浆(PRP),再以更高的离心力第二次离心。结果沉淀中常含有不易再混悬的血小板聚集物。有两种方法可使压实的血小板沉淀物容易再混悬:(1)在第二次离心前加人CD,使PRP的pH降低,(2)在
欢迎：、、)
支持CAJ、PDF文件格式，仅支持PDF格式
【相似文献】
中国期刊全文数据库
柳云宗;[J];国际输血及血液学杂志;1988年04期
柳云宗;;[J];国际输血及血液学杂志;1988年05期
黄威;[J];国外医药.抗生素分册;1989年04期
王鸿祥;黄留拴;陈健荣;;[J];检验医学;1989年03期
刘焕亮;;[J];国际输血及血液学杂志;1989年05期
赵乃莉;;[J];国际输血及血液学杂志;1990年05期
;[J];国际输血及血液学杂志;1992年02期
Nlan TE;Gallup DG;刘梦梅;;[J];国外医学.妇产科学分册;1992年01期
,曾毅;[J];国际输血及血液学杂志;1993年02期
李桂英;唐燕萍;郎洁先;姜跃琴;潘丽华;李秀松;;[J];上海医学;1993年12期
中国重要会议论文全文数据库
朱列荣;林容冰;;[A];中国输血1999年年会暨纪念ABO血型发现100周年学术交流论文专辑[C];1999年
田兆嵩;;[A];国际输血协会第十一届西太地区大会论文专辑[C];2001年
;[A];国际输血协会第十一届西太地区大会论文专辑[C];2001年
;[A];国际输血协会第十一届西太地区大会论文专辑[C];2001年
王志毅;朱佑民;魏存平;余红玲;张振建;皮清燕;续立艮;;[A];中国输血协会第三届输血大会论文专辑[C];2004年
孔令魁;张宏;王飞;余枝容;孙凤杰;陈悦康;刘怡;;[A];中国输血协会第三届输血大会论文专辑[C];2004年
许先国;朱发明;洪小珍;严力行;;[A];中国输血协会第三届输血大会论文专辑[C];2004年
唐荣才;黄成垠;蔡莉;;[A];中国输血协会第三届输血大会论文专辑[C];2004年
李丽;王明元;程根林;周群刚;夏毓伟;曹维娟;;[A];中国输血协会第三届输血大会论文专辑[C];2004年
冯念伦;苏本华;;[A];中华医学会医学工程学分会第七次学术年会论文集[C];2004年
中国重要报纸全文数据库
郭晓婧;[N];湖北日报;2000年
吴瀚;[N];医药经济报;2002年
本报记者　
袁跃;[N];财会信报;2005年
;[N];大众卫生报;2005年
谈春荣;[N];健康报;2005年
夏强;[N];卫生与生活报;2005年
记者　冯桦 通讯员　张增田;[N];福州日报;2006年
记者　刘圆圆;[N];华夏时报;2006年
闫龑 白莹;[N];健康报;2006年
本报记者　李颖;[N];科技日报;2006年
中国博士学位论文全文数据库
刘勇;[D];吉林大学;2005年
宋扬;[D];四川大学;2005年
卢小生;[D];中国协和医科大学;2006年
张洪涛;[D];第一军医大学;2006年
张卫兵;[D];华中科技大学;2006年
田学忠;[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
中国硕士学位论文全文数据库
孙青刚;[D];青岛大学;2002年
刘兴文;[D];第一军医大学;2004年
李威;[D];福建医科大学;2004年
杨进;[D];福建医科大学;2004年
林敏魁;[D];福建医科大学;2004年
邱建忠;[D];青岛大学;2005年
熊隆江;[D];江西医学院;2005年
黄爱文;[D];第一军医大学;2005年
周毅;[D];武汉大学;2005年
潘永海;[D];青岛大学;2006年
&快捷付款方式
&订购知网充值卡
400-819-9993
《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司
同方知网数字出版技术股份有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 知识超市公司
出版物经营许可证 新出发京批字第直0595号
订购热线：400-819-82499
服务热线：010--
在线咨询：
传真：010-
京公网安备74号