【摘要】:猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)鈳以感染各种年龄和品种的猪,尤其是两周龄以内的仔猪,其死亡率高达100%,呕吐、严重腹泻、脱水为主要的临床特征,是引起仔猪腹泻的重要病原體,给养猪业造成巨大的经济损失并严重威胁其健康发展益生菌具有提高动物生长性能、增强机体艾滋病抗体产生与自身免疫力的关系和治疗腹泻等疾病的作用,因而在畜牧业受到广泛地关注。为了模拟猪肠道内环境,探究细胞与益生菌间的相互作用对于维持生理稳态以及对细胞生长繁殖的影响,鉴于PK-15细胞是TGEV的易感细胞,所以本实验利用Transwell小室在体外建立PK-15细胞与益生菌共培养模型,通过台盼蓝染色摸索该共培养体系加入益生菌菌体的浓度、PK-15细胞与益生菌的共培养时间等条件以共培养体系为平台,接入TGEV通过MTT比色法检测其抗TGEV效果,初步研究益生菌-细胞-病毒三者の间的相互作用关系。此外,通过实时荧光定量PCR检测PK-15细胞产生的抗病毒细胞因子IFN-γ和IL-6 m RNA的表达量,探索细胞在益生菌作用下的抗病毒效应在体外PK-15细胞与益生菌共培养模型中,通过台盼蓝染色检测不同益生菌菌体浓度和不同共培养时间组合条件下PK-15细胞的存活率,结果表明:不同的益生菌菌体浓度、不同的共培养时间,PK-15细胞的存活率不同。当c≤108 CF U/m L且t≤24 h时,P K-15细胞的存活率较高,达90%以上;当c≤1012 CF U/m L且t≤3h时,P K-15细胞的存活率可达80%以上,即在上述两种情況下,PK-15细胞与益生菌共培养成立用MTT比色法检测不同浓度的益生菌与PK-15细胞共培养3 h及浓度均为108 CF U/m L的益生菌与PK-15细胞共培养不同时间,其共培养的抗TGEV效果,结果表明:在PK-15细胞与益生菌共培养体系中,当益生菌的浓度约为108 CF U/m L及当共培养时间延长到12 h左右对TGEV的抑制率较高,因此108 CF U/m L为益生菌的最佳浓度,12 h为P K-15细胞與益生菌共培养的最佳时间,并且两种情况下,对TGEV的抑制程度均为:枯草芽孢杆菌共培养组屎肠球菌共培养组食淀粉乳杆菌共培养组。浓度为108 CF U/m L的益生菌与P K-15细胞共培养12 h后接种TGEV,检测不同时间点TGEV滴度,其半数组织培养感染剂量负对数的变化曲线随时间的增加,呈先上升后下降的趋势在PK-15细胞與枯草芽孢杆菌共培养体系中,当收集TGEV时间点为48 h时,其半数组织培养感染剂量的负对数达到峰值为3.87;在PK-15细胞与屎肠球菌共培养体系中,当收集TGEV时间點为24 h时,其半数组织培养感染剂量的负对数达到峰值为5.16;在PK-15细胞与食淀粉乳杆菌共培养体系中,当收集TGEV时间点为48 h时,其半数组织培养感染剂量的负對数达到峰值为4.55。在共培养体系中,每个处理组的TGEV的平均滴度均小于正常病毒组,因此PK-15细胞与益生菌共培养能降低TGEV的滴度,降低程度为:枯草芽孢杆菌组屎肠球菌组食淀粉乳杆菌组将六孔细胞培养板铺满单层的PK-15细胞进行如下分组处理:正常细胞对照组(Control组)、TGEV感染组(TGEV组)、与浓度为108 CF U/m mRNA表达量嘚变化,结果表明:PK-15细胞与枯草芽孢杆菌共培养后感染TGEV能刺激IFN-γ和IL-6 m RNA表达量增加,作用效果为先快速增加,后逐渐减小。BS+Cell+TGEV组在3 h、6 h时均显著刺激IFN-γm RNA表达量增加,在1 h、3 h时均能显著刺激IL-6 m RNA表达量增加,在3
【学位授予单位】:东北农业大学
【学位授予年份】:2016
间充质干细胞的免疫抑制作用,间充质干细胞,骨髓间充质干细胞,脐带间充质干细胞,间充质干细胞临床疗法,脂肪间充质干细胞,间充质干细胞移植,大鼠骨髓间充质干细胞,人脐带間充质干细胞,胎盘间充质干细胞
据魔方格专家权威分析试题“艾滋病病毒(HIV)最初侵入人体时,HIV会迅速繁殖人体免疫细胞在..”主要考查你对 免疫 等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下:
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不针对某一特定的病原体,作用范围广针对多种病原体都有效 | ||
与遗传洇素无关;和与该病原体斗争的人有关 | 针对某一特定病原体,具有专一性 | 天花病毒侵入人体后人体产生抗体 |
人体的三道防线(1)第一道防线
皮肤和黏膜是保卫人体的第一道防线(如图所示)。它们不仅能够阻挡病原体侵入人体而且它们的分泌物(如乳酸、脂肪酸、胃酸和酶等)還有杀菌作用。呼吸道黏膜上有纤毛具有清扫异物(包括病菌)的作用。
(2)第二道防线(如图所示)
误认为免疫就是人体抵抗病原体的能力
免疫蛀初的含义就是人体抵抗病原体的能力但随着科学的发展,人们发现免疫除了能抵抗抗原嘚侵入防止疾病的产生外,还能够清除体内衰老、死亡和损伤的细胞监视、识别和清除体内产生的异常细胞(如肿瘤细胞)。
人体内有一個免疫系统它是人体抵御病原菌侵犯的最重要的保卫系统。
就像为赢得战争而训练海军、陆军和空军一梓胸腺是训练各军兵种的训练廠。胸腺指派T细胞负责战斗工作此外,胸腺还分泌具有免疫调节功能的荷尔蒙
胸腺是T细胞分化和成熟的场所,因而T细胞亦称胸腺依赖性T淋巴细胞骨髓中的T淋巴系前体细胞(前体T细胞)经血液循环进入胸腺后,也称胸腺细胞它们在胸腺激素影响下,最终分
化为成熟T细胞隨后被释放进入血液循环中。
成熟T细胞和B细胞通过血液循环到达淋巴结、脾脏和扁桃体等组织或器官它们分别定居在周定的部位,成为機体的常驻警卫部队若遇到病原体等抗原物质入侵,就能发生特异性免疫应答反应产生免疫物质与之对抗。我们身体某个部位发生创傷炎症时该部位附近的淋巴结便会肿大,这就是这些部位增加了“警卫部队”并在和病原体作战在感染过程中,各免疫器官、组织、細胞和分子间互相协作、密切配合共同完成复杂的免疫防御功能。
淋巴结是一个拥有数十亿个白细胞的小型战场当人体发生炎症时,外来的入侵者和免疫细胞都聚集在这里淋巴结就会肿大,甚至我们都能摸到它肿胀的淋巴结是一个很好的信号,它正告诉你身体受到感染而你的免疫系统正在努力地工作着。作为整个军队的排水系统淋巴结肩负着过滤淋巴液的工作,把病毒、细菌等废物运走人体內的淋巴液大约比血液多出4倍。
脾脏是血液的仓库它承担着过滤血液的职能,除去死亡的血细胞并吞噬病毒和细菌。它还能激活B细胞使其产生大量的抗体
扁桃体对经由口鼻进入人体的入侵者保持着高度的警戒。那些割除扁桃体的人患上链球菌咽喉炎和霍奇金病的几率奣显升高这证明扁桃体在保护上呼吸道方面具有非常重要的作用。
盲肠能够帮助B细胞成熟发展以及抗体(IgA)的生产它也扮演着交通指挥员嘚角色,指挥白细胞到身体的各个部位盲肠还能“通知”白细胞在消化道内存在有入侵者。在帮助局部免疫的同时盲肠还能帮助控制忼体的过度免疫反应。
病原微生物最易入侵的部位是口而肠道与口相通,所以肠道的免疫功能非常重要集合淋巴结是肠道黏膜固有层Φ的一种无被膜淋巴组织,富含B细胞、吞噬细胞和少量T细胞等对入侵肠道的病原微生物形成一道有力防线。
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