在分化诱导因子作用下,正常植物细胞培养基的主要成分可以摆脱抑制、合成干扰素,该过程发生的实质是

四川大学 硕士学位论文 干扰素-γ对转化生长因子-β1诱导肾小管上皮植物细胞培养基的主要成分转分化及结 缔组织生长因子表达的作用 姓名:李勤 申请学位级别:硕士 专业:内科学(肾内) 指导教师:樊均明 四川大学临床医学硕十学位论文 第一1一页 干扰素一Y对转化生长因子一p1诱导肾小管上皮植物细胞培养基嘚主要成分 转分化及结缔组织生长因子表达的作用 研究生:李 勤 导 师:樊均明 教授 摘 要 目的:’肾脏小管间质纤维化是慢性肾脏疾病共有的病理形态学特 点也是慢性肾脏疾病最终发展至终末期肾病的共同途径。在小管间 质纤维化的过程中’肾小管上皮植物细胞培养基的主要成汾转分化 (tubularepithelial- myofibroblasttransdifferentiation,TEMT)发挥了重要作用,抑制植物细胞培养基的主要成分 转分化可能是治疗纤维化的途径之一有研究表明干扰素一Y可以抑 制植物细胞培养基的主要成分的增殖及植物细胞培养基的主要成分胶原合成,提示干扰素一Y可能用于治疗纤维化 疾病在本实验中,我们研究干扰素┅Y对肾脏近端小管上皮转分化 的作用为临床防治肾间质纤维化以及终末期肾脏疾病提供理论与实 验依据。 方法:将体外培养的正常大鼠肾尛管上皮植物细胞培养基的主要成分 (NRK52E)分为空 白对照组、干扰素一Y药物对照组、TGF-01诱导组及不同剂量干扰 素一Y阻断组每组设3复孔,共培养5天使用倒置显微镜、扫描 电镜观察植物细胞培养基的主要成分形态和超微结构;通过免疫植物细胞培养基的主要成分化学染色观察肌成纤维 植物细胞培养基的主要成分特异性标志物 a-SMA以及TGF-01下游因子CTGF的表达:以流 式植物细胞培养基的主要成分术测量 a-SMA+植物细胞培养基的主要成分百分数囷平均辉度;应用RT-PCR检测 a -SMAmRNA,CTGFmRNA的表达:并以NASA法测定上清液中胶原III的 含量。 四川大学临床医学硕 卜学位论文 第一2一页 结果:①TGF-01诱导组肾小管上皮植物细胞培养基的主要成分从原有典型的上皮植物细胞培养基的主要成分 转分化为长梭形肌成纤维植物细胞培养基的主要成分样植物细胞培养基的主要成分;免疫植物细胞培养基的主要成分化学染色可见大量细 胞表达 a-SMA;a-SM.A十植物细胞培养基的主要成分百分数及 -SMA表达的平均荧光强 度 (MICF)均明显增加 (p<0.05);。-SMAmRNA,CTGFmRNA表达较其 他各组明显增加 (P<0.05);植物细胞培养基的主要成分上清液中胶原III含量增加 (P (P<0.05);并可不同 程度地抑制TGF-01的促胶原III合成增多作用 (P<0.05). 结论:TGF-01可诱导腎小管上皮植物细胞培养基的主要成分转分化并促进CTGF表达 和植物细胞培养基的主要成分外基质成分胶原川的合成,干扰素一Y能够抑制TGF-A1诱導 的TEMT作用抑制CTGF的表达,减少胶原III的分泌对肾间质纤维 化具有负性调节作用,其作用途径可能是通过下调CTGF的表达

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