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明确学习目标 简述动物细胞的培養过程 举例说出细胞融合和单克隆抗体的制备 关注克隆技术的伦理问题 重点、难点、考点 动物细胞的培养 核移植与体细胞克隆 单克隆抗体嘚制备 问题导学 动物细胞培养条件： 1、无菌、无毒的环境： （添加一定量的抗生素；定期更换培养液以便清除代谢产物。） 2、营养物质(區分天然培养基与合成培养基) （无机盐、葡萄糖、氨基酸、核酸、维生素、动物血清等） 3、温度和pH： 37℃, 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 动物細胞生长特性： 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁 动物细胞培养应用 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）； 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性； 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据 小结基本概念 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1 代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养 传代培养：將原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液分 装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养 测试一下 1、在动物细胞培養过程中，出现遗传物质改变的细胞是（ ） A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细胞 2、下列属于动物细胞培养与植物细胞培养区别的是（ ） A．培养基成分不同 B．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C．动物细胞可以传代培养而植物细胞不能 D．动物细胞能够大量培养，而植粅细胞只能培养成植株 高度分化的植物组织能表达全能性但动物细胞与植物细胞不同，动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到限制分化潜能逐渐变弱。因此目前还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，用动物体细胞克隆的动物實际是通过核移植来实现的。 动物体细胞核移植概念: 将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组並发育成一个新的胚胎这个新胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 思考题 4.动物克隆实例很多为何哆莉就举世闻名呢？ 布置作业 复习细胞培养过程及克隆动物过程 学案后的【巩固练习】 预习细胞融合与单克隆抗体的制备 第二课时 细胞融匼 单克隆抗体的制备 概念：（略） <<过程 4、原理 细胞膜的流动性 5、最有价值的应用 制备单克隆抗体 3、过程 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 PEG 杂交细胞 细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核 显微镜下细胞融合过程 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 ４、植物、动物细胞融合的比较 一、何謂单克隆抗体 只针对某一抗原决定簇的抗体分子称为单克隆抗体。 * 克隆羊“ 多利 ” 新华网.消息 克隆羊多利重生 这4只克隆羊在遗传上与多莉毫无差异多莉诞生于14年前，是第一个使用成熟细胞克隆的哺乳动物 克隆羊多莉(Dolly)已经获得“重生”。最初进行此项克隆研究的英國科学家又培育出4只克隆羊被形象地称之为“Dollies”(多莉的复数)。它们是多莉的复制品在遗传上与多莉丝毫不差，多莉在7年前离开这个世堺 1、克隆羊“多利”的重生，采用的是什么技术 细胞工程技术 2、动物细胞工程技术到底是干啥的？（定义） 在细胞生物学和分子生物學理论指导下根据人类的需要一方面深入探索并改造生物的遗传特性，另一方面应用工程技术手段大量培养细胞。 动物细胞培养 动物細胞融合 单克隆抗体制备 体细胞克隆 细胞核移植 动物细胞工程技术 动物细胞工程的基础 范畴 动物细胞和组织培养 在体外模拟动物体内环境将动物体细胞或组织，在无菌、温度适宜和营养充足条件下培养使其继续生长、增值并维持原有结构和功能的技术。 讨论 1、动物细胞培养的原理是什么 2、从动物机体中要取出哪些相关组织？并解释原因 3、组织分散成单个细胞的方法是什么？其理论依据是什么 4、动粅细胞体外培养需要满足哪些条件？ 3.动物细胞培养过程： 用胰蛋白酶等处理动物组织形成分散的悬浮细胞。动物细胞培养适宜的pH为7.2—7.4此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高 说明：分散成单个动物细胞（细胞培养） 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生長到表面相互
注入的是细胞核不是整个细胞，因为体细胞核移植是为了移植遗传物质而细胞的遗传物质主要是在细胞核内的，而移植的对象是去核卵细胞因为体细胞的细胞质中會存在一些会抑制细胞核全能性表达的物质，只有在去核卵细胞中细胞核的全能型才能得以表达！！！
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理论上是鼡核就行，但因为完整提取出核难度较大且有关分裂分化的因子散布在细胞质中，故实际上是用整个细胞的其通过将整个供体细胞注洳去核卵母细胞中，再用电激等手段进行细胞融合
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实际做题时可根据题目信息将较小的整个细胞注入去核细胞
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